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酱油中山梨酸、苯甲酸的测定

2012/6/9 21:02:46  作者:labgogo


一、目的与要求:

 

    1、掌握酱油、水果汁、果酱中山梨酸、苯甲酸的测定原理及方法。

 

    二、原理:

 

    样品酸化后,用乙醚提取山梨酸,苯甲酸。将样品提取液浓缩,点于浆酰胺薄层板上,展开,显色后,根据薄层板上山梨酸,苯甲酸的比移值与标准比较定性,并可进行概略定量。

 

    三、试剂与仪器(中华试剂网提供):

 

1、异丙醇

 

2、正丁醇

 

3、石油醚沸程:30-60℃。

 

4、乙醚:不含过氧化物

 

5、氨水

 

6、6N盐酸:取100毫升盐酸

 

7、无水乙醇

 

8、聚酰胺粉:200目。

 

    9、山梨酸标准溶液:精密称取0.2000克山梨酸,用少量乙醇溶解后移入100毫升容量瓶中,并稀释至刻度,此溶液每毫升相当于200毫克山梨酸。

 

    10、苯甲酸标准溶液:精密称取0.2000克苯甲酸,用少量乙醇溶解后移入100毫升容量瓶中,并稀释至刻度,此溶液每毫升相当于2毫克苯甲酸。

 

    11、展开剂

 

    (1)正丁醇-氨K--无水乙醇(7:1:2)

 

    (2)异丙醇-氨水-无水乙醇(7:1:2)

 

    12、显色剂:O.04%溴甲酚紫的50%乙醇溶液,用0.1N氢氧化钠溶液

 

调至PH=8。

 

13、4%氯化钠酸性溶液:于4%的氯化钠溶液中加少量6N盐酸酸化。

 

14、吹风机。

 

15、层析缸。

 

16、玻璃板:10 X 18cm

 

17、微量注射器:10微升,100微升。

 

18、喷雾器。

 

四、操作方法

 

1、样品提取

 

  称取2.5克事先混合均匀的样品,置于25毫升带塞量筒中,加0.5毫升6N盐酸酸化,用15、10毫升乙醚提取两次,每次振摇1分钟,将上层醚提取液吸 人另一个25毫升带塞量筒中,合并乙醚提取液。用3毫升4%氯化钠酸性溶液洗涤两次,静止15分钟,用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤人25毫升容量瓶中。 加乙醚至刻度混匀,吸取l0.0毫升乙醚提取液分两次置于10毫升带塞离心管中,在约40 (2的水浴上挥发干,加入0.10毫升乙醇溶解残渣,备用。

 

    2、测定

 

    (1)聚酰胺粉板的制备:称取1.6克聚酰胺粉,加0.4克可溶性淀粉加约重5毫升,研磨3-5分钟,立即倒入涂布器内制成10 X  8cm、厚度0.3mm的薄层板两块,于室温干燥后保存,于80℃干燥1小时,取出,置于干燥器中保存。

 

    (2)点样:在薄层板下端2cm的基线上,用微量注射器点1微升,2微升样品液,同时各点1微升、2微升山梨酸、苯甲酸标准溶液。

 

    (3)展开与显色:将点样后的薄层板放人预先盛有展开剂[(1)或(2)]的展开槽内,展开槽周围贴有滤纸,待溶剂前沿上展至lOcm,取出挥干,喷显色 剂、斑点成黄色,背景为蓝色。样品中所含有山梨酸、苯甲酸的量与标准斑点比较定量(山梨酸、苯甲酸的比移值依次为0.82,0.73)。

 

                      A×1000

 

计算:    X=( A×1000)/(m×10/25×V2/V1×1000)

 

X:样品中山梨酸(苯甲酸)的含量,g/kg;

 

A:测定用样品液中山梨酸(苯甲酸)的含量,mg;

 

M:样品质量,g;

 

Vl:加入乙醇的体积,ml.,

 

V2:测定时点样的体积,ml;    ·

 

10:测定时吸取乙醚提取液的体积,ml;

 

25:样品乙醚提取液总体积,m1。

 

注:此方法还可以同时测定果酱、果汁中的糖精。


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