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肉制品中亚硝酸盐的测定

2012/6/9 20:57:47  作者:labgogo


一、目的与要求:

 

    1、明确亚硝酸盐的测定与控制成品质量的关系。

 

    2、明确与掌握盐酸萘乙二胺法的基本原理与操作方法。

 

    二、原理:

 

    样品经沉淀蛋白质,除去脂肪后,在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,生成的重氮化合物,再与萘基盐酸二氨乙烯偶联成紫红色的重氮染料,产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比,可以比色测定。反应式如下:

 

 

三、试剂与仪器-中华试剂网提供

 

1、亚铁氰化钾溶液:称取106克亚亚铁氰化钾[K4Fe9(CN)5.3H2O],溶于水后,稀释至1000毫升。

 

    2、乙酸锌溶液:称取220克乙酸锌,二水[Zn(CH2C00)2·2H20],加30毫升冰乙酸溶于水,并稀释至1000毫升。

 

    3、饱和硼砂溶液:称取5克十水四硼酸钠(Na2B07·10H20),溶于100毫升热水中,冷却后备用。

 

    4、0.4%对氨基苯磺酸溶液:称取0.4克对氨基苯磺酸,溶于100毫升20%的盐酸中,避光保存。

 

    5、0.2%盐酸萘乙二胺溶液:称取0.2克盐酸萘乙二胺,溶于100毫升水中,避光保存。

 

    6、亚硝酸钠标准溶液:精密称取0.1000克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠,加水溶解移入500毫升容量瓶中,并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于200微克亚硝酸钠。

 

    7、亚硝酸钠标准使用液:临用前,吸取亚硝酸钠标准溶液5.00毫升,置于200毫升容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠。

 

    8,小型绞肉机。

 

    9、分光光度计。

 

    四、操作方法:

 

    1、样品处理:称取5.0克经绞碎混匀的样品,置于50毫升烧杯中,加工2.5毫升饱和溶液,搅拌均匀,以70℃左右的水约30毫升将样品全部洗入500 毫升容量瓶中,置沸水浴中加热15分钟,取出后冷至室温,然后一面转动一面加入5毫升亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5毫升乙酸锌溶液以沉淀蛋白质,加水至 刻度,混匀,放置0.5小时,除去上层脂肪,清液用滤纸过滤弃去初滤液30毫升,滤液备用。

 

    2、测定

 

    吸取40毫升上述滤液于50毫升比色管中,另吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50毫升亚硝酸 钠标准使用液(相当于0、1、2、3、5、7、10、12.5微克亚硝酸钠),分别置于50毫升比色管中,于标准与样品管中分别加入2毫升0.4%对氨基 苯磺酸溶液,混匀,静置3-5分钟后各加入1毫升0.2%盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15分钟,用2厘米比色杯,以零管调节零点,于波长 538nm处测吸光度,绘制标准曲线比较。

 

计算:  X=(A×1000)/(m×40/500×1000×1000)

 

X:样品中亚硝酸盐的含量,g/kg;

 

m:样品质量,g;

 

A:测定用样液中亚硝酸盐的含量,ug.


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