辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)具有分子量小,标记方法简单,性质稳定等优点,是临床检验试剂中常用的酶。该产品广泛用于各类生化检测项目及免疫类(ELISA)试剂盒。中华试剂网辣根过氧化物酶的底物种类丰富,可满足不同的实验需求。
■ HRP的发色底物
辣根过氧化物酶发色底物为过氧化物和供氢体(DH2),其真正底物是H2O2,但人们习惯把供氢体称为底物或统称供氢体底物。在ELISA中常用的供氢体有以下几种:
1、OPD是ELISA技术中应用较多的供氢体,酶作用后显黄色(最大吸收波长为492 nm),其灵敏度高,测定方便。
2、TMB是近年来常用的一种供氢底物,经酶作用后显天蓝色,目测对比度鲜明,加酸终止酶反应后变黄色(最大吸收波长为450 nm),易比色定量测定。
3、DBA供氢底物,其反应产物为不能溶解的棕色吩嗪衍生物,可用不同光镜观察。此种多聚物能被还原和螯合四氯化碳,形成具有电子密度的产物,便于用电镜观察。
中文名称
|
英文名称
|
反应产物
|
CAS
|
包装
|
邻苯二胺
|
o-Phenylenediamine, OPD, 99.5%
|
黄色、可溶性
|
|
100 g
500 g
|
3,3',5,5'-四甲基联苯胺
|
3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine, TMB, 99%
|
蓝色(黄色)、可溶性
|
|
1 g
5 g
|
3,3'-二氨基联苯胺
|
3,3'-Diaminobenzidine, DAB, 99%
|
棕色、不溶性
|
|
25 g
100 g
|
联苯胺
|
Benzidine, 95%
|
蓝色、不溶性
|
|
25 g
250 g
|
四甲基联苯胺硫酸盐
|
N-(3-Sulfopropyl)-3,3',5,5-tetramethylbenzidine,sodium salt, TMB-PS, 99%
|
蓝色、可溶性
|
|
5 g
25 g
|
5-氨基水杨酸
|
5-Aminosalicylic acid, 98.5%
|
棕色、可溶性
|
|
25 g
100 g
500 g
|
2,2'-二氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)铵盐
|
Azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid-2NH4-salt
|
绿色、可溶性
|
30931-67-0 |
1 g
|
3-氨基-9-乙基咔唑
|
3-Amino-9-ethylcarbazole, AEC
|
红色、可溶性
|
132-32-1 |
5 g
25 g
|
4-氯-1萘酚
|
Chloro-1-naphthol
|
蓝色、可溶性
|
604-44-4 |
25 g
|
※ 小贴士:氧化物、硫化物、氟化物及叠氮化物等可抑制HRP的活性,故勿用这类试剂作为防腐剂。
■ HRP的发光底物
鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酰肼,Luminol)或其衍生物如异鲁米诺(4-氨基邻苯二甲酰肼,Isoluminol),是一类重要的发光试剂。用HRP标记抗体,进行免疫反应后,利用鲁米诺作为发光底物,在HRP和起动发光试剂(NaOH+H2O2)作用下,鲁米诺发光,发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。反应过程如下图所示:
产品编号
|
中文名称
|
英文名称
|
CAS
|
纯度
|
包装
|
328061
|
鲁米诺
|
Luminol
|
|
98%
|
1 g
5 g
25 g
|
分子式:C8H7N3O2
分子量:433.63
熔点:194-195℃
储存条件: 2-8°C
|
|
产品编号
|
中文名称
|
英文名称
|
CAS号
|
纯度
|
包装
|
A5300
|
异鲁米诺
|
Isoluminol
|
3682-14-2 |
98%
|
1 g
10 g
|
分子式:C8H7N3O2
分子量:177.16
熔点:194-195℃
储存条件: 2-8°C
|
|
■ 配套产品
中文名称
|
英文名称
|
CAS号
|
纯度
|
包装
|
4-碘苯酚
|
4-Iodophenol
|
|
99%
|
5 g
25 g
100 g
|
四苯基硼酸钠
|
Sodium tetraphenylborate
|
|
99.5%(ACS)
|
25 g
100 g
500 g
|
牛血清白蛋白
|
Bovine serum albumin [ Fraction V], BSA
|
|
——
|
5 g
25 g
100 g
|
十二烷基硫酸钠
|
Dodecyl sulfate sodium salt, SDS
|
|
99%
|
100 g
500 g
|
脱氧胆酸钠
|
Sodium deoxycholate
|
|
98%
|
25 g
100 g
500 g
|
苯甲基磺酰氟化物
|
Phenylmethylsulfonyl fluoride, PMSF
|
|
99%
|
25 g
100 g
|
亮抑酶肽
|
Leupeptin
|
|
96.5%
|
10 mg
50 mg
|
三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐
|
Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride, Tris-HCl
|
|
99%
|
25 g
100 g
500 g
|
吐温80
|
Polysorbate 80
|
|
——
|
250 mL
1 L
|