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乳酸含量(LA)检测试剂盒 微量法

2024/10/10 13:11:09  作者:索莱宝


乳酸含量(LA)检测试剂盒 微量法

测定意义:乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。

测定原理:乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生成NADH和H+,H+传递给PMS生成的PMSH2还原INT生成红色物质,在530nm处有特征吸收峰。

需要的仪器,耗材:天平、研钵、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、

购买链接:BC2230 产品规格检索 (labgogo.com)

Solarbio

 

   乳酸含量(LA)检测试剂盒 微量法

一、样本处理 1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,12000g离心10min,取上清测定。 2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入 1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);于4℃, 12000g离心10min,取上清测定。 3. 血清:直接测定。二、测定操作样品对照管 样品测定管 标准对照管 标准测定管样品(μL) 50 50 标准品(μL) 50 50 Solarbio  H2O(μL) 300 450 300 450 试剂一(μL) 150 150 试剂二(μL) 200 200 200 200 显色液(μL) 300 300 300 300 充分混匀,于37℃反应30min,于1mL玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定530nm处吸光值,分别记为A1,A2,A3,A4,△A样=A2-A1;△ A标= A4-A3 注意:标准对照管和标准测定管只需测定一次 ,每个样品测定管设一个样品对照管。

 

1. 按照蛋白含量计算 LA含量(μmol/mg prot)= △A样÷△A标×C标÷ Cpr = 2×△A样÷△A标÷ Cpr 2. 按照样本质量计算 LA含量(μmol/g鲜重)= △A样÷△A标×C标÷ W = 2×△A样÷△A标÷ W 3. 按照细胞数量计算 LA含量(μmol/104 cell)= △A样÷△A标×C标÷ 细胞数量 = 2×△A样÷△A标÷ 细胞数量 4. 按照液体体积计算 LA含量(μmol/mL)= △A样÷△A标×C标 = 2×△A样÷△A标 C标:标准品浓度,2mmol/L,W:样本质量,g/mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL

相关文献:

《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影响因子:5.959 PMID:30850587
《Wearable Carbon Nanotube-Based BioSensors on Gloves for Lactate》 作者:Xiaojin Luo, Weihua Shi , Haoming Yu , Zhaoyang Xie , Kunyi Li  and Yue Cui  期刊:Sensors 影响因子:3.031 PMID:30314270

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