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胃蛋白酶测定试剂盒 微量法

2024/10/25 9:05:30  作者:索莱宝


胃蛋白酶测定试剂盒 微量法

测定意义:胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌,分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别,慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。

测定原理:胃蛋白酶可催化血红蛋白水解,水解产物与福林试剂反应后显蓝色;一定范围内,其颜色的深浅与胃蛋白酶活性呈正比。

需要的仪器,耗材:可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。 

购买链接:BC2325 产品规格检索 (labgogo.com)

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胃蛋白酶测定试剂盒 微量法

1、用石英比色皿  按样本蛋白浓度计算:活性单位(U)定义:37℃下每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。胃蛋白酶(U/mg prot)=(?A÷?÷d×V 反总)÷(Cpr×V 样本)÷T = 0.786×?A÷Cpr (2) 按样本鲜重计算:活性单位(U)定义:37℃下每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。胃蛋白酶(U/g)胃蛋白酶(U/g 鲜重)=(?A÷?÷d×V 反总)÷(W×V 样本÷V 提)÷T =0.786×?A÷W。 Cpr:粗酶液蛋白质浓度(mg/mL),需要另外测定;V 反总:反应总体积,0.22mL;V 提:提取液体积,1mL;T:催化反应时间,10min;V 样本:加入样本体积,0.02mL;?:酪氨酸吸光系数,1.4? mol-1·mL·cm-1 ;d:光程,1cm。 2、用 96 孔 UV 板按样本蛋白浓度计算:活性单位(U)定义:37℃下每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。胃蛋白酶(U/mg prot)=(?A÷?÷d×V 反总)÷(Cpr×V 样本)÷T = 1.57×?A÷Cpr (3) 按样本鲜重计算:活性单位(U)定义:37℃下每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。胃蛋白酶(U/g)胃蛋白酶(U/g 鲜重)=(?A÷?÷d×V 反总)÷(W×V 样本÷V 提)÷T =1.57×?A÷W。 Cpr:粗酶液蛋白质浓度(mg/mL),需要另外测定;V 反总:反应总体积,0.22mL;V 提:提取液体积,1mL;T:催化反应时间,10min;V 样本:加入样本体积,0.02mL;?:酪氨酸吸光系数,1.4? mol-1·mL·cm-1 ;d:光程,0.5cm。

 

提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。试剂一:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 10 mL 试剂二充分溶解。试剂二:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 10mL 蒸馏水充分溶解。

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