胃蛋白酶测定试剂盒 微量法
测定意义：胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌，分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别，慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。
测定原理：胃蛋白酶可催化血红蛋白水解，水解产物与福林试剂反应后显蓝色；一定范围内，其颜色的深浅与胃蛋白酶活性呈正比。
需要的仪器，耗材:可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
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胃蛋白酶测定试剂盒 微量法
1、用石英比色皿 按样本蛋白浓度计算：活性单位（U）定义：37℃下每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。胃蛋白酶（U/mg prot）=（?A÷?÷d×V 反总）÷（Cpr×V 样本）÷T = 0.786×?A÷Cpr （2） 按样本鲜重计算：活性单位（U）定义：37℃下每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。胃蛋白酶（U/g）胃蛋白酶（U/g 鲜重）=（?A÷?÷d×V 反总）÷（W×V 样本÷V 提）÷T =0.786×?A÷W。 Cpr：粗酶液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；V 反总：反应总体积，0.22mL；V 提：提取液体积，1mL；T：催化反应时间，10min；V 样本：加入样本体积，0.02mL；?：酪氨酸吸光系数，1.4? mol-1·mL·cm-1 ；d：光程，1cm。 2、用 96 孔 UV 板按样本蛋白浓度计算：活性单位（U）定义：37℃下每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。胃蛋白酶（U/mg prot）=（?A÷?÷d×V 反总）÷（Cpr×V 样本）÷T = 1.57×?A÷Cpr （3） 按样本鲜重计算：活性单位（U）定义：37℃下每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。胃蛋白酶（U/g）胃蛋白酶（U/g 鲜重）=（?A÷?÷d×V 反总）÷（W×V 样本÷V 提）÷T =1.57×?A÷W。 Cpr：粗酶液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；V 反总：反应总体积，0.22mL；V 提：提取液体积，1mL；T：催化反应时间，10min；V 样本：加入样本体积，0.02mL；?：酪氨酸吸光系数，1.4? mol-1·mL·cm-1 ；d：光程，0.5cm。
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加入 10 mL 试剂二充分溶解。试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 10mL 蒸馏水充分溶解。