柠檬酸（CA）含量测定试剂盒 微量法
测定意义：CA是生物体内常见的有机酸，是重要的食品风味物质。此外，CA是三羧酸循环*步反应的产物。
测定原理：酸性条件下，柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+，在545nm处有特征吸收峰；通过测定545nm吸光值的增加，即可计算出样品中柠檬酸含量。
需要的仪器，耗材:低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
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柠檬酸（CA）含量测定试剂盒 微量法
操作步骤：一、样品中柠檬酸提取： 1. 液体样品中柠檬酸提取：取 0.1mL 液体加试剂一 0.9mL，充分混匀，11000g， 4℃离心 10min，取上清液，待测。 2. 组织中柠檬酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。11000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。 3. 线粒体中柠檬酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆，600g/min，4℃离心 5min；取上清另一 EP 管中，11000g， 4℃离心 10min，弃上清（此上清液可用于细胞质 CA 含量测定）；向沉淀中加试剂二 200μl，以及试剂三 2μl，充分悬浮溶解，11000g，4℃离心 10min，取上清液，待测。 4. 细菌、真菌中：按照细胞数量（10 4个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）； 11000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。二、测定操作： 1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min，调节波长到 545 nm，蒸馏水调零。 2. 试剂一置于 30℃水浴中预热 30min。 3. 空白管：取 0.5 mL EP 管，依次加入 20μL 蒸馏水，140μL 试剂一，20μL 试剂四，20μL 试剂五，混匀后室温静置 30min，于 545nm 测定吸光度，记为 A 空白管。 4. 标准管：取 0.5 mL EP 管，依次加入 20μL 标准液，140μL 试剂一，20μL 试剂四，20μL 试剂五，混匀后室温静置 30min，于 545nm 测定吸光度，记为 A 标准管。 5. 测定管：取 0.5 mL EP 管，依次加入 20μL 上清液，140μL 试剂一，20μL 试剂四，20μL 试剂五，充分混匀后室温静置 30min，于 545nm 测定吸光度，记为 A 测定管。
相关文献:
《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影响因子:5.959 PMID:30850587
《Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication》 作者:Luo M,Luo Y, Mao N, Huang G, Teng C,Wang H, Wu J, Liao X, Yang J 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影响因子: PMID:30453281