FDA水解酶活性检测试剂盒
操作步骤:
一、 样本处理称取风干过 30-50 目筛土壤约 0.1g,备用。
二、 测定操作表空白管 标准管 对照管 测定管样本(g) 0.05 0.05 标准液(μL) 40 双蒸水(μL) 40 试剂一(μL) 200 200 240 200 试剂二(μL) 40 充分混匀,30℃,震荡 1h 试剂三(mL) 160 160 160 160 10000g,25℃,离心 5min,取 200μL 上清于微量石英比色皿/96 孔板中测定 490nm 处吸光值 A,△ A1=A 标准管-A 空白管,△ A2=A 测定管-A 对照管
注意:空白管和标准管只需测定一次。
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FDA水解酶活性检测试剂盒
标准液:液体 4mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 40mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂 1 瓶,-20℃避光保存,临用前加 4mL 试剂三溶解。
试剂三:液体 40mL×1 瓶,4℃保存。
酶活性计算公式
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
酶活性定义:每克土壤每天产生 1μmol 荧光素的量为一个酶活力单位。 FDA 活性(μmol/d/g)=(△ A2÷△ A1×C 标准品)×V 反总÷W = 2.4×(△ A2÷△ A1)÷W
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
酶活性定义:每克土壤每天产生 1μmol 荧光素的量为一个酶活力单位。 FDA 活性(μmol/d/g)=(△ A2÷△ A1×C 标准品)×V 反总÷W = 2.4×(△ A2÷△ A1)÷W C 标准品:标准品浓度 100μmol/L;V 反总:反应总体积,0.4mL;W:样本质量,g
注意事项:
1. 尽量采用新鲜土样或者短期低温保存样品,否则很难准确反映酶的活性。
2. 测定之前进行预实验,若吸光值较高,请进行适当的稀释再测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。