纖ç¶ç´ 酶（CL）測定試劑盒 å¾®é‡æ³•
æ“作æ¥é©Ÿï¼š
一ã€æ¨£å“測定的準備：
1ã€ç´°èŒæˆ–細胞：收集細èŒæˆ–細胞到離心管內(nèi)，離心åŽæ£„ä¸Šæ¸…ï¼›æŒ‰ç…§æ¯ 500 è¬ç´°èŒæˆ–ç´°èƒžåŠ å…¥ 1mL æå–液，超è²å†°æµ´ç ´ç¢Žç´°èŒæˆ–細胞（功率 20ï¼…ï¼Œè¶…è² 3S 秒，間隔 10S，é‡å¾© 30 次）；8000g 4℃離心 10min，å–上清，置冰上待測。
2ã€çµ„織：稱å–ç´„ 0.1g çµ„ç¹”åŠ å…¥ 1mL æå–液，冰浴ä¸å‹»æ¼¿ã€‚8000g ，4℃離心 10min，å–上清，置冰上待測。
二ã€åŠ 樣表和測定æ¥é©Ÿï¼šè©¦åŠ‘å稱（μL） å°ç…§ç®¡ 測定管 標準管試劑一 50 50 - 試劑二 200 200 - 雙蒸水 50 50 - 樣本 50 - 煮沸的樣本 50 - 混勻，40℃準確水浴 30min，å–出åŽç«‹å³æ”¾å…¥æ²¸æ°´ä¸ç…®æ²¸ 15min,得糖化液 混勻，540nm 處蒸餾水調(dià o)零，測定å¸å…‰å€¼ A，樣å“管計算ΔA=A 測定管-A å°ç…§ç®¡ã€‚標準曲線的建立：540nm 處蒸餾水調(dià o)零，讀標準管å¸å…‰å€¼ A。以濃度（y）為縱å標，å¸å…‰åº¦ A（x）為橫å標建立標準曲線。
購買éˆæŽ¥ï¼šBC2545 產(chÇŽn)å“è¦(guÄ«)æ ¼æª¢ç´¢ (labgogo.com)
纖ç¶ç´ 酶（CL）測定試劑盒 å¾®é‡æ³•
CL æ´»åŠ›è¨ˆç®—ï¼šæ ¹æ“š(jù)標準曲線，將ΔA 帶入公å¼ä¸ï¼ˆx）計算樣å“濃度 y（mg/mL）。 1ã€æŒ‰ç…§è›‹ç™½æ¿ƒåº¦è¨ˆç®—å–®ä½çš„å®šç¾©ï¼šæ¯ mg 組織蛋白在å應體系ä¸æ¯åˆ†é˜å‚¬åŒ–產(chÇŽn)生 1μg è‘¡è„糖定義為一個酶活力單ä½ã€‚ CL 活力（U /mg prot）ï¼1000×y×V å總÷（V 樣×Cpr）÷T=233×y÷Cpr 2ã€æŒ‰æ¨£æœ¬é®®é‡è¨ˆç®—å–®ä½çš„å®šç¾©ï¼šæ¯ g 組織在å應體系ä¸æ¯åˆ†é˜å‚¬åŒ–產(chÇŽn)生 1μg è‘¡è„糖定義為一個酶活力單ä½ã€‚ CL 活力（U/g é®®é‡ï¼‰ï¼1000×y×V å總÷（W×V 樣÷V 樣總）÷T =233×y÷W 3ã€æŒ‰ç´°èŒæˆ–細胞密度計算單ä½çš„定義：æ¯1è¬å€‹ç´°èŒæˆ–細胞在å應體系ä¸æ¯åˆ†é˜å‚¬åŒ–產(chÇŽn)生1μg è‘¡è„糖定義為一個酶活力單ä½ã€‚ CL 活力（U/10 4 cell）ï¼1000×y×V å總÷（500×V 樣÷V 樣總）÷T =0.467×y 1000：1mg/mL=1000ug/mLï¼›V å總：å應體系總體ç©ï¼Œ0.35mLï¼› V æ¨£ï¼šåŠ å…¥æ¨£æœ¬é«”ç©ï¼Œ 0.05 mLï¼›V æ¨£ç¸½ï¼šåŠ å…¥æå–液體ç©ï¼Œ1 mLï¼›T：å應時間，30 minï¼›Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度， mg/mLï¼›W：樣本質(zhì)é‡ï¼Œgï¼›500：細èŒæˆ–細胞總數(shù)，500 è¬ã€‚
纖ç¶ç´ 酶（CL）測定試劑盒 å¾®é‡æ³•
æå–液：液體 50mL×1 瓶，4℃ä¿å˜ï¼›è©¦åŠ‘一：液體 4mL×1 瓶，4℃ä¿å˜ï¼›è©¦åŠ‘二：液體 10mL×1 瓶，4℃ä¿å˜ï¼›è©¦åŠ‘三：液體 13mL×1 瓶，4℃ä¿å˜ï¼›æ¨™æº–å“：粉劑×1 支，4℃ä¿å˜ï¼Œå« 10mg ç„¡æ°´è‘¡è„糖（干燥失é‡<0.2%），臨用å‰åŠ å…¥ 1ml 蒸餾水溶解，é…åˆ¶æˆ 10mg/ml è‘¡è„糖溶液備用，4℃å¯ä¿å˜ 1 周，或者用飽和苯甲酸溶液溶解，å¯ä¿å˜æ›´é•·æ™‚間。