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乙酰膽堿酯酶(AchE)測(cè)定試劑盒 微量法

2024/9/24 8:46:15  作者:索萊寶


乙酰膽堿酯酶(AchE)測(cè)定試劑盒 微量法

測(cè)定意義:AchE屬于絲氨酸水解酶,廣泛存在于各種動(dòng)物組織和血清中。AchE催化乙酰膽堿(Ach)水解,在神經(jīng)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)中起重要作用。

測(cè)定原理:AchE催化Ach水解生成膽堿,膽堿與二硫?qū)ο趸郊姿幔―TNB)作用生成5-巰基-硝基苯甲酸(TNB);TNB在412nm處有吸收峰,通過(guò)測(cè)定412 nm吸光度增加速率,計(jì)算AchE活性。

需要的儀器,耗材:紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。

購(gòu)買(mǎi)鏈接:BC2025 產(chǎn)品規(guī)格檢索 (labgogo.com)

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?乙酰膽堿酯酶(AchE)測(cè)定試劑盒 微量法
微量法
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

貨號(hào):BC2025

規(guī)格:100 管/96 樣

產(chǎn)品內(nèi)容:

試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1 瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 1.3mL 試劑二,充分震蕩溶解。

試劑四:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 1.3mL 試劑二,充分震蕩溶解。

產(chǎn)品說(shuō)明: AchE 屬于絲氨酸水解酶,廣泛存在于各種動(dòng)物組織和血清中。AchE 催化乙酰膽堿(Ach)水 解,在神經(jīng)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)中起重要作用。 AchE 催化 Ach 水解生成膽堿,膽堿與二硫?qū)ο趸郊姿幔―TNB)作用生成 5-巰基-硝基苯甲 酸(TNB);TNB 在 412nm 處有吸收峰,通過(guò)測(cè)定 412nm 吸光度增加速率,計(jì)算 AchE 活性。 自備儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍和蒸 餾水。

操作步驟:

一、粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,8000g4℃離心 10min,取上清液待測(cè)。

2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn) 細(xì)胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時(shí)間 3min); 然后 8000g,4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測(cè)。

3. 血清等液體:直接測(cè)定。

二、測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 412nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二置于 37℃水浴中預(yù)熱 30min。

3. 空白管:取微量石英比色皿/96 孔板,依次加入 20μL 蒸餾水、 160μL 試劑二、 10μL 試劑三和 10μL 試劑四,迅速混勻,于 412nm 處測(cè)定 3min 內(nèi)吸光值變化,第 10s 吸光值記為 A1,第 190s 吸光 值記為 A2。△A 空白管=A2-A1 4. 測(cè)定管:取微量石英比色皿/96 孔板,依次加入 20μL 上清、160μL 試劑二、10μL 試劑三和 10μL 試劑四,迅速混勻,于 412nm 處測(cè)定 3min 內(nèi)吸光值變化,第 10s 吸光值記為 A3,第 190s 吸光 值記為 A4。△A 空白管=A4-A3

注意:空白管只需測(cè)定一次

相關(guān)文獻(xiàn):

《Effects of extraction methods on the physicochemical characteristics and biological activities of polysaccharides from okra (Abelmoschus esculentus)》 作者:Qin Yuan,Shang Lin,Yuan Fu,Xi-Rui Nie,Wen Liu,Yan Su,Qiao-Hong Han,Li Zhao,Qing Zhang,De-Rong Lin,Wen Qin ,Ding-Tao Wu 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:30639655
《Correlations of MMP-1, MMP-3, and MMP-12 with the degree of atherosclerosis, plaque stability and cardiovascular and cerebrovascular events》 作者:WEI HU, RUI WEI, LIYUE WANG, JINGQIAN LU,HONGMING LIU and WEI ZHANG 期刊:EXPERIMENTAL AND THERAPEUTIC MEDICINE  影響因子:1.448 PMID:29434795
《Resveratrol reverses the adverse effects of diet-induced obese murine model on oocyte quality and zona pellucida softening》 作者:Zhenzhen Jia,Zeyang Feng ,Lining Wang , Hao Li , Hongyu Wang, Dingqi Xu , Xin Zhaob, Daofu Fengd, Xizeng Feng 期刊:Food & Function 影響因子:3.241 PMID:29682638
《Correlations of chemokine CXCL16 and TNF-α with coronary atherosclerotic heart disease》 作者:Jieyong Xing Yanshao Liu Tao Chen 期刊:Experimental and Therapeutic Medicine 影響因子:1.448 PMID:29399085
《Long noncoding RNA lncARSR promotes hepatic cholesterol biosynthesis via modulating Akt/SREBP-2/HMGCR pathway》 作者:Jiabin Huang,Shangjun Chen,Dongliang Cai,Deqiang Bian,Fengling Wang 期刊:Life Sciences 影響因子:3.448 PMID:29678744

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